摘要
[目的]为了诊断奶牛是否处于发情或妊娠状态,本研究建立一种奶牛孕酮浓度的电化学检测方法。[方法]采用蛋白A将孕酮单克隆抗体固定在电极表面,然后用固定浓度的孕酮抗原分别与不同浓度的孕酮单克隆抗体进行反应,反应过程采用交流阻抗法进行表征分析,并用Zsimpwin和SAS软件对数据分析处理,得到孕酮单克隆抗体浓度与阻抗之间的关系,构建了奶牛孕酮浓度无标记阻抗免疫传感器,实现对奶牛孕酮浓度的检测。[结果]预处理后的电极氧化还原电流比可达1.02,改善了丝网印刷金电极的电化学活性。用SAS软件对拟合数据分析后,得到孕酮单克隆抗体浓度x和阻抗y之间的回归方程为y=27.183 x+80.258,决定系数R2=0.9093,显著性检验概率p值为0.0119,确定了孕酮阻抗传感器的抗体最佳反应浓度为8mg·L-1。[结论]此检测方法为奶牛的健康养殖提供了有效的检测手段。
- 单位