布鲁氏菌和鹦鹉热衣原体双重PCR检测方法的建立与应用

作者：彭武丽; 罗展荣; 史茜; 员丽娟; 于学辉; 季新成

来源：中国畜牧兽医, 2014, 41(04): 7-11.

• 布鲁氏菌
• 鹦鹉热衣原体
• 双重PCR
• 共扩增

为建立同时检测布鲁氏菌和鹦鹉热衣原体的双重PCR方法,本研究据GenBank上已发表的具有属间特异性的布鲁氏菌bp26基因和鹦鹉热衣原体23SrRNA基因,利用Primer Premier 5.0软件各设计1对特异性引物,扩增的目的片段长度分别为219和356bp。通过优化反应条件,建立了能同时检测布鲁氏菌和鹦鹉热衣原体的双重PCR方法。该方法具有较好的特异性和可重复性,对2种基因单重PCR检测敏感性均达到3.1×102拷贝/反应,双重检测的灵敏度为3.1×103拷贝/反应。利用该双重PCR方法对流产牛抗凝全血、血清、流产胎儿及奶液共172份临床疑似布鲁氏菌感染的样品进行检测,检测到布鲁氏菌阳性样品53份,鹦鹉热衣原体阳性样品2份,以上这2种病原的阳性检出率分别为30.8%和1.2%,且检测到2种病原混合感染的阳性样品2份,阳性检出率为1.2%。临床应用结果表明,该方法可用来对布鲁氏菌和鹦鹉热衣原体进行同步、快速、灵敏的检测。

• 单位
  新疆出入境检验检疫局; 生命科学学院; 石河子大学