乙型肝炎表面抗原结合人乳中乳铁蛋白的筛选与鉴定

作者：张昭萍; 刘景丽; 冯静; 戴毅敏; 胡娅莉; 周乙华^*

来源：中华围产医学杂志, 2019, 22(07).

• 乳, 人
• 乳铁蛋白
• 乙型肝炎表面抗原

目的乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg)阳性产妇乳汁中含有乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV), 但母乳喂养不增加母婴传播风险。既往研究显示母乳具有与HBsAg结合的特点, 本研究旨在确定母乳中能与HBsAg结合的成分。方法本研究于2015年6月至2017年2月在南京大学医学院附属鼓楼医院完成。取2例HBV血清学标志均阴性的健康产妇的乳汁, 同时用牛乳和山羊乳为对照。通过间接免疫印迹技术, 观察高纯度重组酵母HBsAg与乳清蛋白结合情况, 结合蛋白质谱分析结果, 进一步通过竞争抑制实验, 确定母乳中能与HBsAg结合的蛋白成分。结果间接免疫印迹显示, 2例母乳乳清泳道均可在分子量约80 000处发现明显的反应条带, 而牛乳和羊乳无相应条带。该反应条带处的蛋白质经蛋白质谱分析, 提示与5种蛋白质序列同源性为28.4%～93.4%, 其中同源性最高(93.4%)的蛋白为人乳铁蛋白。使用纯化的重组人乳铁蛋白, 进一步经间接免疫印迹验证, 显示人乳铁蛋白能与重组HBsAg结合。竞争抑制实验证明, 纯化的重组人乳铁蛋白能显著抑制HBsAg与乙肝表面抗体的结合, 且随乳铁蛋白浓度降低, 抑制率降低。结论母乳中人乳铁蛋白能与HBV结合。进一步研究乳铁蛋白能否抑制HBV的感染性, 对阐明母乳喂养不增加HBV母婴传播具有重要意义。

• 单位
  南京大学医学院附属鼓楼医院