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摘要
利用毕赤酵母表达系统首次克隆表达了一个油菜籽来源的Kunitz蛋白酶抑制剂基因(RTI;rti),分离纯化后对该抑制剂进行了理化特征分析。结果显示:在摇瓶发酵水平,重组RTI诱导表达水平达到628 mg·L-1,抑制剂比活性达到69.6 TIU·mg-1蛋白;重组RTI在30～90℃可保持70%以上抑制活性,在pH 2.0～11.0保持80%以上抑制活性;金属离子Cu2+和Co2+,有机试剂甲醇、乙醇、丙酮和氯仿对其有抑制作用;重组RTI以非竞争性抑制方式与胰蛋白酶作用,对胰蛋白酶具有很强的、专一性抑制作用,属于典型的植物Kunitz型胰蛋白酶抑制剂。结合其良好的理化特性,重组RTI具有开发为抗虫蛋白的潜力。
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单位聊城大学; 生命科学学院
