摘要

目的研究具绿色荧光蛋白报道系统的端粒酶基因真核质粒载体在真核细胞中的表达情况。方法用Lipo-fectAMINE 2000介导重组端粒酶pEGFP-hTRT质粒转染293细胞及人正常口腔黏膜细胞,经荧光显微镜、激光共聚焦显微镜观察荧光表达并进行流式细胞仪检测转染效率,采用RT-PCR检测转染细胞中外源性hTRT的表达。结果质粒在293细胞及人正常口腔黏膜细胞中正确表达,外源性端粒酶在细胞中表达。293细胞及人正常口腔黏膜角化细胞转染效率分别为34.74%和6.88%。结论 hTRT基因荧光表达载体在真核细胞中表达,便于观察转染情况,对研究组织工程种子细胞的衰老问题具有重要的意义。