骨桥蛋白在体外对小鼠子宫内膜蜕膜化的调节作用

作者：梅忆媛; 王晓博; 谢青贞^*

来源：中华生殖与避孕杂志, 2022, 42(01): 65-71.

• 骨桥蛋白
• 小鼠子宫内膜
• 蜕膜化

目的探讨骨桥蛋白(osteopontin, OPN)是否参与体外诱导小鼠子宫内膜基质细胞(mouse endometrial stromal cells, mESCs)蜕膜化的过程及其调节作用。方法采用雌激素(10 nmol/L)和孕酮(1 μmol/L)处理mESCs进行体外诱导蜕膜化, 检测OPN的表达变化。设立Opn质粒过表达组及Opn shRNA敲减组, 分别将Opn过表达质粒和Opn shRNA转染mESCs, 同时设立阴性对照组, 采用实时定量PCR及Western blotting法检测转染效率;CCK-8法检测每组细胞的增殖情况;采用实时定量PCR和Western blotting法检测小鼠子宫内膜蜕膜化标志分子蜕膜/滋养层催乳素相关蛋白(decidual/trophoblast-layer prolactin related protein, Dtprp)和血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A, Vegfa)及其受体2(vascular endothelial growth factor A receptor 2, Vegfr2)表达情况。结果雌激素+孕酮诱导蜕膜化mESCs中Dtprp(P<0.001)、Vegfa(P=0.004)和Vegfr2(P=0.002)mRNA 水平显著增加, 同时Opn mRNA(P=0.002)和OPN蛋白(P<0.001)的表达水平也显著增加;Opn过表达可促进mESCs细胞增殖(P=0.004), 而敲减Opn可抑制mESCs细胞增殖(P=0.008);转染Opn过表达质粒可进一步促进蜕膜化mESCs中Dtprp(P<0.001)、Vegfa(P=0.021)和Vegfr2(P=0.012)的mRNA表达, 同时Vegfa蛋白水平也显著增加(P=0.001);敲减Opn后, 则可降低蜕膜化mESCs中Dtprp(P=0.009)、Vegfa(P=0.007)和Vegfr2(P=0.001)的mRNA表达, VEGFA蛋白的表达水平也相应降低(P<0.001)。结论 OPN参与调节小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化进程及功能。

• 单位
  武汉大学人民医院