摘要
目的 研究miRNA-21通过对血小板源性生长因子B(PDGF-B)和血管内皮生长因子(VEGF)的调控促进肝星状细胞(HSC)活化的分子机制。方法 将大鼠肝星状细胞HSC-T6分为正常组、酒精组、miRNA-21模拟物组和miRNA-21抑制剂组。正常组给予含有10%胎牛血清的DMEM培养基正常培养48 h;酒精组给予含有100 mmol·L-1乙醇和10%胎牛血清的DMEM培养基培养48 h; miRNA-21模拟物组将miRNA-21模拟物用Lip3000转染试剂瞬时转染入细胞,再用含有100 mmol·L-1乙醇和10%胎牛血清的DMEM培养基培养48 h; miRNA-21抑制剂组将miRNA-21抑制剂用Lip3000转染试剂瞬时转染入细胞,再用含有100 mmol·L-1乙醇和10%胎牛血清的DMEM培养基培养48 h。用CCK-8实验检测细胞的增殖情况,用蛋白质印迹法检测PDGF-B和VEGF因子的表达情况。结果 正常组、酒精组、miRNA-21模拟物组和miRNA-21抑制剂组的细胞增殖率分别为0.17±0.01,0.27±0.01,0.49±0.03和0.14±0.01。PDGF-B在酒精组的表达量(0.45±0.04)均显著高于正常组(0.21±0.03,P<0.05)和miRNA-21抑制剂组(0.20±0.03,P<0.01),而显著低于miRNA-21模拟物组的表达量(0.88±0.05,P<0.01)。VEGF在各组的表达变化则与PDGF-B的表达变化相同。结论 miRNA-21能够通过对PDGF-B和VEGF的调控来促进HSC的增殖与活化,促进HSC成纤维化的进展。
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单位分子医学重点实验室; 基础医学院; 河南科技大学; 河南科技大学第一附属医院