重组酶介导的定点整合及在构建重组CHO细胞中的应用

作者：孙瑾瑜; 刘光; 李晨; 王颖^*; 刘国庆^*

来源：中国生物工程杂志, 2022, 42(12): 52-60.

DOI：10.13523/j.cb.2207027

• 基因编辑
• 定点整合
• 重组酶
• CHO
• 重组酶介导盒式交换

中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells, CHO)是生产治疗性重组蛋白最常用的细胞。随机整合(random integration, RI)工艺是目前构建重组CHO细胞株的主要策略，由于CHO细胞基因组缺乏稳定性，为得到产量高、品质好且适应特定工艺的细胞株，通常需要1～2轮高通量筛选，不仅工作量大、耗时长且批次稳定性差。定点整合(site-specific integration, SSI)基因编辑技术将外源基因整合至细胞基因组的特定位点，经一轮筛选得到稳定、高产且适应特定生产工艺的细胞株，从而缩短细胞株构建周期。近年来，不断有将定点整合策略应用于构建重组CHO细胞株的报道。基因编辑技术的发展是实现细胞外源基因定点整合工艺的基础，常用的基因编辑技术包括核酸酶技术、转座子技术和重组酶技术。比较这三种基因编辑技术在构建流程、整合效率和专利等方面的不同特点，重点讨论重组酶介导的定点整合及其在CHO细胞株构建中的应用。

• 单位
  上海复宏汉霖生物技术股份有限公司; 中国药科大学