ASK1-P38α/JNK对除草醚诱导的先天性膈疝肺血管的影响

作者：谭诚; 黄晓松; 靳茜雅; 侯昉; 李瑶悦; 刘文英^*; ***

来源：中华小儿外科杂志, 2022, 43(08): 743-749.

• 先天性膈疝
• 凋亡信号调节激酶1
• p38丝裂原激活的蛋白激酶
• 除草醚

目的探究丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase, MAPK)通路中ASK1-P38α/JNK在除草醚诱导的先天性膈疝动物模型肺中的表达情况。方法选取健康成年SPF级SD大鼠, 怀孕后通过数字随机法分为空白对照组、膈疝组和膈疝+西地那非干预组3组, 通过HE染色检测胎肺发育情况、免疫组织化学定位各组胎肺中的凋亡信号调节激酶1(apoptosis signalregulating kinase 1, ASK1)、丝裂原活化蛋白激酶14(mitogen activated protein kinase 14, P38α)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)蛋白和实时定量聚合酶链反应(quantificational real time polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测各组胎肺的死亡结构域相关蛋白(Death domain associated protein, DAXX)、ASK1、MAPK激酶3(MAP kinase kinase 3, MKK3)、P38α、MAPK激酶4(MAP kinase kinase 4, MKK4)及JNK的mRNA相对表达量。结果成功获得对照组4只孕鼠50只活胎、膈疝组6只孕鼠84只活胎, 干预组4只孕鼠37只活胎。HE染色后与正常组相比, 膈疝组的肺明显发育不良及血管重构, 干预组明显改善。免疫组织化学显示, ASK1、P38α、JNK在各个组中均有表达, 定位在肺叶边缘、气管、气管软骨、周围结缔组织、发育不良全肺叶及部分血管。qRT-PCR显示, ASK1与上游DAXX、下游P38α和JNK均呈正相关(r=0.778、P<0.001, r=0.816、P<0.001和r=0.284、P=0.044), ASK1的mRNA表达量升高导致了下游P38α和JNK升高。DAXX中, 膈疝组和干预组均较对照组升高(1.28±0.41、1.31±0.30比1.00±0.20, P<0.05);ASK1中, 膈疝组较对照组显著升高(1.51±0.70比1.00±0.23, P<0.05);MKK3中, 干预组较对照组和膈疝组升高(1.21±0.32比1.00±0.18、0.97±0.35, P<0.05);MKK4中, 干预组较对照组和膈疝组显著升高(1.52±0.40比1.00±0.25、1.19±0.38, P<0.05)。结论在除草醚诱导的先天性膈疝动物模型肺中, 肺发育不良可能与MAPK通路中的ASK1-P38α/JNK上调有关。

• 单位
  四川省人民医院; 电子科技大学