粗壮女贞水提物对氧化三甲胺诱导的血管内皮细胞炎症保护作用及机制

作者:万思齐; 杨飞; 刘思静; 何方婷; 张保超; 何琪云娜; 裴晓方*; 许欣*
来源:食品安全质量检测学报, 2022, 13(05): 1414-1422.
DOI:10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2022.05.027

摘要

目的 探究粗壮女贞(Ligustrum robustum,LR)水提物对氧化三甲胺(trimethylamine N-oxide,TMAO)诱导的血管内皮细胞炎症反应的抑制作用及机制。方法 采用TMAO诱导EA.hy926细胞炎症反应,设置对照组、TMAO组(800μmol/L TMAO)、LR低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0 mg/m L)、香蜂草苷低、中、高剂量组(20、40、60μmol/L)和芦丁低、中、高剂量组(20、40、60μmol/L)。酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent sorbent assay,ELISA)测定各组细胞培养上清液中白细胞介素6 (interleukin-6,IL-6)、白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的分泌量。实时荧光定量聚合酶链式反应(realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR)法和western blot法检测炎症通路相关基因和蛋白质表达水平;间接免疫荧光法观察核转录因子-κB (nuclear factor-κB,NF-κB)的核定位。结果 TMAO诱导后EA.hy926细胞IL-6、IL-8、TNF-α、ICAM-1分泌量增加(P<0.05、P<0.01),相较于TMAO组,除LR水提物低剂量对IL-6、TNF-α及LR水提物高剂量对ICAM-1分泌量无影响外(P>0.05),LR水提物预处理可下调IL-6、IL-8、TNF-α、ICAM-1分泌量(P<0.05、P<0.01),香蜂草苷和芦丁预处理可下调TNF-α、ICAM-1分泌量(P<0.05)。LR水提物、香蜂草苷和芦丁预处理可使p38、Nf-κb mRNA水平降低(P<0.05),p38、NF-κB p65蛋白磷酸化比例降低(P<0.05),NF-κB核定位减少。结论 TMAO可诱导血管内皮细胞炎症反应,LR水提物、香蜂草苷和芦丁可以通过抑制EA.hy926细胞p38/NF-κB通路的激活达到抗炎作用。

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