摘要

分离培养仔猪关节软骨细胞,从中提取总RNA,采用RTPCR法扩增出关节软骨细胞中胰岛素样生长因子Ⅰ(IGFⅠ)的cDNA,与pMD18T载体相连,转化JM109大肠埃希氏菌,提取质粒,经鉴定,所扩增的片段为目的片段。在此基础上培养仔猪关节软骨细胞,并在培养液中添加不同水平的铜,分别在第0、12、24、48h收集软骨细胞,提取总RNA,采用RTPCR法扩增出IGFⅠ的cDNA,以βactin为内参,用凝胶分析系统对扩增出的cDNA进行扫描分析,计算IGFⅠmRNA基因表达的相对水平。结果,在细胞培养液中添加不同水平的铜能促进软骨细胞中IGFⅠmRNA基因表达,其中以铜浓度31.2μmol/L的效...

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