摘要
目的:在前期实验中,我们通过体外构建干扰人源性ETS变异基因1(human ETS variant gene1,hETV1)基因shRNA的载体,干扰ETV1表达,进而影响胃肠间质瘤细胞的侵袭作用,在此,我们继续通过上述方法,观察胃肠间质瘤细胞增殖与凋亡的影响.方法:体外构建干扰hETV1基因shRNA的慢病毒载体,感染GIST-T1细胞.实验分成3组:空白组、阴性对照组[PLVX(逆转录病毒)-shRNA组]、实验组(PLVX-shRNA-ETV1组),用Western blot方法对合成的靶点进行筛选,采用体外增殖培养试验(MTT法)和流式细胞凋亡检测感染前后细胞增殖与凋亡的情况.结果:在MTT实验的前期阶段,实验组细胞增殖数量未见明显下降,与空白组(P=0.539、P=0.188)及阴性对照组(P=0.877、P=0.992),无显著性差异,而在后期阶段,实验组细胞增殖数量明显受到抑制,与空白组(P=0.014、P=0.000、P=0.020)及阴性对照组(P=0.011、P=0.000、P=0.003),有显著性差异;同时在细胞凋亡试验中,实验组其凋亡率比空白组(P=0.000)及阴性对照组(P=0.000)明显增高,有显著性差异.结论:通过体外干扰ETV1转录因子,导致GIST-T1细胞在实验后期阶段有明显抑制作用,细胞凋亡明显增加,从而影响胃肠间质瘤细胞的进展.
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单位武汉大学中南医院; 赣南医学院第一附属医院