芹菜素-7-葡萄糖苷通过lRE1/ASK1/P38 MAPK途径对草酸诱导的HK-2细胞损伤发挥修复作用

作者：李德; 刘俊炜; 宋钱林; 何子奇; 孙畅; 姜声明; 董才韬; 杨嗣星^*

来源：临床泌尿外科杂志, 2022, 37(06): 440-446.

DOI：10.13201/j.issn.1001-1420.2022.06.008

• 芹菜素-7-葡萄糖苷
• 草酸
• 细胞凋亡
• 肾结石
• 氧化应激
• 活性氧

目的:探讨自然界中常见的类黄酮糖苷化合物芹菜素-7-葡萄糖苷(A7DG)对草酸诱导的人近端肾小管上皮细胞HK-2损伤是否具有修复作用及其具体作用途径。方法:培养HK-2细胞到80%生长密度后分成3组并进行不同处理：(1)NC组：换用基础培养液继续培养；(2)OX组：换用含浓度为2 mmol/L草酸的基础培养液进行培养；(3)A7DG药物干预组：换用含2 mmol/L草酸和不同浓度的A7DG的基础培养液进行培养。经不同条件处理24 h后，分别对3组HK-2细胞进行细胞活力检测(CCK-8)、乳酸脱氢酶(LDH)及抗氧化能力相关指标还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)检测，使用荧光显微镜检测线粒体膜电位(MMP)的变化，使用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞内NOX4、NOX2、p22、GRP78/BIP、IRE1、p-IRE1、p-ASK1、p38、p-p38、CHOP以及炎症相关因子IL-2、IL-6的蛋白表达情况。结果:CCK-8实验结果表明OX组细胞存活率较NC组明显降低，而A7DG减轻了OX对HK-2细胞的损伤。LDH、GSH、SOD及MDA检测结果表明A7DG可降低草酸预处理后HK-2细胞NADPH氧化酶的释放，通过干预草酸介导的活性氧(ROS)减轻草酸对HK-2细胞产生的损伤，并使异常的MMP恢复至正常。此外，蛋白质印迹显示A7DG干预下氧化应激特征蛋白如GRP78,CHOP以及IRE1途径关键蛋白p-IRE1、p-ASK、p-MAPK的蛋白表达显著降低，氧化应激损伤途径中IL-2、IL-6等炎性因子的表达也降低。结论:本研究结果证实A7DG在草酸诱导的HK-2细胞损伤中具有积极修复作用，且通过IRE1/ASK1/P38MAPK信号通路发挥积极地抗氧化作用，A7DG可为草酸介导的肾损伤和尿路结石的治疗提供新的参考。

• 单位
  武汉大学人民医院