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摘要
斜带石斑鱼Epinephelus coioides是具有较高经济价值的海水鱼，如何促进石斑鱼生产性状改良一直是科学研究的重点之一。肌肉生长抑制素（mstn,myostatin）是调节肌肉生长的重要转化因子。本研究中，Mstn的亚细胞定位表明Mstn在斜带石斑鱼细胞质中呈点状分布。利用酶标仪测定被Mstn重组蛋白刺激肌肉原代细胞1～5d后的A值，发现实验组细胞生长明显减缓，随着处理时间的增加，细胞活性差异进一步扩大。利用流式细胞仪测定被Mstn重组蛋白刺激的肌肉原代细胞细胞周期，发现实验组细胞周期受阻。用Mstn重组蛋白对肌肉原代细胞进行刺激，通过RT-qPCR检测Mstn重组蛋白对mstn信号通路及下游相关基因的影响，结果表明随着处理浓度的升高，p21、smad3和mrf4 mRNA的表达量也逐渐而上升，其中，smad3和mrf4表达量的上升不存在显著性差异；当处理浓度为100和1 000 nmol/L时，p21存在显著性差异；随着处理浓度的升高，myod和myog mRNA的表达量均下降，但myod mRNA下降趋势不显著，myog mRNA显著下降，当处理浓度为100和1 000 nmol/L时存在显著性差异。本研究揭示了Mstn定位于斜带石斑鱼GS细胞质；Mstn重组蛋白上调smad3、mrf4的表达，下调myod、myog的表达，来促进细胞的分化；同时Mstn重组蛋白能上调p21的表达，抑制细胞的增殖。本研究验证了Mstn在肌肉发育过程中的生物学功能，为后续深入开展mstn对鱼类肌肉发育的影响研究奠定了基础。
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