GⅡ.4诺如病毒P结构域单克隆抗体的制备与鉴定

作者：侯玉珍; 张婷; 胡贵方; 张绪富; 郭伦爱; 戴迎春^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2020, 36(08): 734-739.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009054

• GⅡ.4诺如病毒
• 变异株
• 单克隆抗体(mAb)
• 联合免疫

目的通过多个基因簇变异株联合免疫的方式制备抗GⅡ.4型诺如病毒(NoV)P结构域单克隆抗体(mAb)。方法用复合抗原GⅡ.4型NoV/1996(VA387)、2004、2006b和2010基因簇P颗粒免疫BALB/c小鼠,将成功免疫的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过ELISA筛选出阳性杂交瘤细胞,采用有限稀释法制备mAb并进行纯化, ELISA检测mAb效价和特异性,亚类试剂盒鉴定抗体亚类, NoV P颗粒-HBGA结合阻断实验检测mAb中和能力。结果筛选出13株稳定分泌抗GⅡ.4型NoV P颗粒mAb的杂交瘤细胞株,纯化后的13株mAb效价均在10-4以上,属于IgG1型,且均与不同GⅡ.4型NoV变异株具有结合能力;其中5株mAb与GⅡ.17、GⅡ.3和GⅡ.6型NoV具有结合能力, 3株mAb与GⅡ.2型NoV具有结合能力且具有人类组织血型抗原(HBGA)受体阻断能力。结论通过NoV多个基因簇变异株联合免疫,成功制备出抗GⅡ.4型NoVP结构域的mAb,为基于P颗粒的GⅡ.4型NoV诊断、疫苗及抗体药物的研发奠定了基础。

• 单位
  公共卫生学院; 医药学院; 南方医科大学