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摘要
目的：探究金合欢素（acacetin）对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响，及可能的作用机制。方法：体外培养人骨肉瘤细胞143B和MG63，分别给予不同浓度（0、20、25、30和35μmol/L）的金合欢素处理；随后，分别采用结晶紫染色和MTT法检测细胞的增殖能力，Hoechst33258染色法和FCM法检测细胞的凋亡情况，细胞划痕愈合实验和Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力；最后，采用蛋白质印迹法检测细胞内增殖相关蛋白[增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和c-Myc]、凋亡相关蛋白[Bcl-2、Bax和剪切型Caspase-3(cleaved-Caspase-3)]以及迁移和侵袭相关蛋白[基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、Snail和波形蛋白（Vimentin）和E-钙黏蛋白（E-cadherin）]的表达水平，并进一步检测AKT、磷酸化-AKT(phospho-AKT,p-AKT)、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、p-GSK-3β(ser9)和β-连环蛋白（β-catenin）的表达情况。结果：结晶紫染色和MTT法检测结果表明，金合欢素可抑制骨肉瘤细胞143B和MG63的增殖，且蛋白质印记实验结果表明金合欢素处理可降低143B细胞内增殖相关蛋白（PCNA、Cyclin D1和c-Myc）的表达水平（P均<0.05）。Hoechst33258染色和FCM法检测结果表明，金合欢素可促进骨肉瘤细胞143B的凋亡，且蛋白质印记实验结果显示金合欢素处理可使143B细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平下降，促凋亡蛋白Bax、凋亡标志蛋白cleaved-Caspase-3的表达水平升高（P均<0.01）。细胞划痕愈合实验和Transwell小室实验结果表明金合欢素可抑制骨肉瘤细胞143B的迁移和侵袭，且蛋白质印记实验结果显示金合欢素处理可使143B细胞内MMP-2、Vimentin的表达水平下降，E-cadherin的表达水平升高（P均<0.05）。同时，进一步蛋白质印记实验结果表明，金合欢素处理可使143B细胞内的p-AKT、p-GSK-3β(ser9)和β-catenin蛋白表达水平下降（P均<0.05）。结论：金合欢素可抑制人骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭，并促进其凋亡，其可能是通过阻断AKT/GSK-3β/β-catenin信号通路发挥作用。
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