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摘要
目的探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)对人肾小球系膜细胞(HMCs)IP_3R1蛋白和mRNA表达的影响及PKC在此信号通路中的作用,以期为肝肾综合征(HRS)肾小球滤过率下降的发生机制提供理论依据。方法用实时定量PCR和免疫印迹检测IP_3R1 mRNA和蛋白表达的情况,并分别用蛋白激酶C(PKC)激动剂PMA、PKCα、PKCδ特异性抑制剂及HA-DN-PKCα质粒转染干预上述诱导实验检测IP_3R1的表达变化。此外,免疫印迹检测TNF-α对p-PKCα蛋白的表达影响。结果 TNF-α明显上调IP_3R1蛋白和mRNA表达。PMA、PKCα抑制剂Safingol和HA-DN-PKCα质粒瞬时转染预处理HMCs后,均能明显阻断TNF-α诱导IP_3R1蛋白的表达,而PKCδ抑制剂Rottlerin预处理后,对IP_3R1蛋白表达无明显影响。此外,TNF-α刺激HMCs,各不同时间组总PKCα蛋白表达无明显差异,而TNF-α刺激8 h p-PKCα蛋白表达明显增加。结论 TNF-α能上调人系膜细胞IP_3R1蛋白及mRNA的表达,TNF-α活化PKCα是TNF-α上调IP_3R1表达的重要上游信号。
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单位江西省九江市第一人民医院; 中国医科大学附属第一医院
