摘要
目的构建含人前脑啡肽原基因的腺相关病毒载体(rAAV/hPPE),将此病毒载体通过不同途径注射至慢性疼痛模型大鼠体内,观察rAAV介导的hPPE体内转染的镇痛作用。方法将阳性对照质粒rAAV/hPPE分别经蛛网膜下、尾静脉和骨骼肌3种途径注射至慢性挤压伤疼痛模型大鼠体内,观察注射后大鼠热痛阈和机械痛阈的变化,8周后,处死大鼠,运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定大鼠组织hPPE的表达,用放射免疫方法测定大鼠器官组织中亮氨酸-脑啡肽(L-EK)的含量。结果行为学结果说明3种给药方式均可在5 t~8周内对坐骨神经慢性挤压(CCI)热痛阈和机械痛阈显著升高;L-EK在脊髓组织中表达水平最高的是鞘内注射组而在血管和心肌组织中表达最高的是静脉注射组;PCR结果表明3种给药方式导致不同组织hPPE mRNA表达水平增高。结论将rAAV/hPPE注射到CCI大鼠体内,rAAV能将hPPE导入易感细胞,并获得较好的镇痛效果。
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