摘要

建立一种同时快速检测驴、马、猪及鸭源性成分的四重实时荧光PCR方法。分别以四种源性成分的Nad 5基因、ATpase 6基因、ATP 8基因、cytb基因为靶基因设计特异性引物和TaqMan探针,以18S rRNA基因为内参基因,建立多重实时荧光PCR方法,并对该方法进行方法学验证,同时对不同掺入比例模拟样品、不同加工工艺模拟样品和实际驴肉样品进行检测。结果显示,该方法具有高通量、特异性强、灵敏度高等优点。当Ct值≤35.0时,方法对16种非目标源性具有良好特异性;灵敏度可检测到浓度为2×10~(-4 )ng/μL的模板DNA;对生肉的检出限为肉含量的0.001%,对熟肉制品的检出限为肉含量的0.01%;对100份实际样品进行检测,结果与标准方法一致,说明建立的多重实时荧光PCR法可用于肉及肉制品中常见掺假源性成分的检测。

  • 单位
    北京食品科学研究院; 中国肉类食品综合研究中心