水貂圆环病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

作者：盛陈艳; 麻宝艺; 李健明; 宫庆龙; 刘菲; 时坤; 孙志博; 刘艺; 冷雪; 杜锐

来源：中国动物传染病学报, 2022, 1-10.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20220324.001

• 水貂圆环病毒
• Cap基因
• SYBR Green II实时荧光定量PCR方法

为快速检测水貂圆环病毒（MiCV），本试验根据MiCV Cap基因序列设计合成特异性引物，建立了水貂圆环病毒SYBR Green II实时荧光定量PCR检测方法。结果显示，该方法在模板浓度为1.0×10~(6) copies/μL～1.0×10~(1) copies/μL范围内呈良好线性关系，相关系数为0.998 3。本试验建立的检测方法对水貂阿留申病毒、猪圆环病毒2型、水貂肠炎病毒、犬瘟热病毒和猪伪狂犬病毒进行检测均无特异性扩增，批内和批间CV均小于2%，对重组阳性质粒的检测下限为1.0×10~(1) copies/μL，比普通PCR的敏感度高100倍，对阳性样品DNA的检测下限为2.38×10~(-2) pg/μL，比普通PCR的敏感度高1000倍。应用该方法对吉林省部分毛皮动物养殖场的水貂、狐狸、貉和环境样品进行检测，结果其阳性率分别为57.23%、48.42%、39.71%、和68.48%。上述结果表明，本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法具有良好的灵敏性、特异性和重复性，为MiCV的诊断及流行病学调查提供技术支持。

• 单位
  吉林农业大学; 吉林农业科技学院