~(13)CMFA过程中GC-MS分析菌体蛋白氨基酸的~(13)C标记丰度

作者：王建; 王泽建; 黄明志; 钱江潮; 储炬; 张嗣良

来源：中国生物工程杂志, 2009, (07): 87-93.

DOI：10.13523/j.cb.20090716

• 13C代谢通量分析
• 菌体蛋白氨基酸
• 氨基酸衍生化
• 气相色谱-质谱
• 13C标记丰度信息 13C metabolic flux analysis Proteinogenic amino acids Amino acids derivatized GC-MS 13C labelling pattern

基于13C标记的代谢通量分析(13CMFA)由于具有准确性和应用性已成为国际上代谢工程研究的热点,其中一个至关重要的问题就是分析菌体蛋白氨基酸的13C标记丰度信息。用含20%全标记葡萄糖([U-13C])和80%天然葡萄糖的合成培养基喂养维生素B12生产菌Pseudomonas denitrifican,然后在稳态条件下取20mg带13C标记菌体用1ml6mol/L盐酸95℃水解24h得到带13C标记的菌体蛋白氨基酸;氨基酸经分离、浓缩、真空干燥、MBDSTFA衍生化后得到的TBDMS衍生物可以用气相色谱-质谱(GC-MS)进行分析,最后分析质谱图得到15种菌体蛋白氨基酸的13C标记丰度信息。...

• 单位
  生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学