蜜蜂幼虫芽孢杆菌微滴式数字PCR检测方法的建立

作者：王建峰; 高峰; 郑剑; 倪健波; 黄素文; 张体银; 陈先锋^*

来源：畜牧与兽医, 2019, 51(01): 80-84.

• 幼虫芽孢杆菌
• 微滴式数字PCR
• 检测

为建立新型高灵敏度的幼虫芽孢杆菌微滴式数字PCR (droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,针对幼虫芽孢杆菌16S rRNA基因设计特异性引物和探针。通过对反应体系优化,建立幼虫芽孢杆菌ddPCR检测方法,并对方法的灵敏度、线性关系、特异性及重复性进行评估。结果:建立的方法与其他6株非幼虫芽孢杆菌无交叉反应,具有良好的特异性;线性关系良好(R2=0. 991 4);灵敏度为2. 9 copies/μL; ddPCR检测的相对标准偏差(RSD)在0. 93%～5. 27%,重复性好。试验表明本研究建立的ddPCR方法可以对幼虫芽孢杆菌进行绝对定量检测。

• 单位
  福建出入境检验检疫局; 宁波检验检疫科学技术研究院