双孢蘑菇萎锈灵抗性基因定点突变的载体构建与遗传转化

作者：卢园萍; 肖婷婷; 尚俊军; 曾志恒; 陈美元^*; 鲍大鹏^*

来源：菌物学报, 2021, 40(12): 3256-3264.

DOI：10.13346/j.mycosystema.210347

• 食用菌
• 遗传转化
• 抗性标记
• 萎锈灵

为建立更为安全、有效的双孢蘑菇遗传转化体系,构建了双孢蘑菇琥珀酸脱氢酶的铁硫蛋白亚基Agsdi1突变(His突变为Leu)表达载体pAgsdi1,并通过农杆菌介导方法转化双孢蘑菇W192,经萎锈灵筛选以及PCR扩增和MnlⅠ酶切验证后获得了转化菌株。验证结果表明,点突变的铁硫蛋白亚基Agsdi1可以作为双孢蘑菇有效的抗性标记基因。因其并未引入新的外源基因,是一种比潮霉素抗性基因更为安全的筛选标记,将可用于双孢蘑菇等食用菌的遗传转化。

• 单位
  上海市农业科学院食用菌研究所; 福建省农业科学院