摘要

目的探讨微小RNA-135a(miR-135a)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、迁移和凋亡的影响及可能的机制。方法构建miR-135a过表达和空载病毒的Saos-2细胞分别为miR-135a UP组(实验组), Control组(对照组)。采用实时定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)检测c-Myc信使核糖核酸(mRNA)的改变, 采用蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测c-Myc蛋白及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)(PAM)通路蛋白的改变。细胞集落形成和细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞增殖能力, 划痕和Transwell实验分别检测迁移和侵袭能力, 细胞流式技术检测抗凋亡能力, 两组比较采用t检验。结果 miR-135a表达量实验组高于对照组(59.006±5.034比1.008±0.151, t=23.031, P<0.01), c-Myc与PAM通路蛋白表达量实验组低于对照组, 细胞增殖能力实验组低于对照组(CCK-8法:1.311±0.048比2.029±0.046, t=24.301, P<0.01;集落形成:0.210±0.034比1.000±0.016, t=36.715, P<0.01), 迁移能力实验组低于对照组(0.539±0.097比1.000±0.037, t=7.694, P<0.01), 侵袭能力实验组低于对照组[(77.333±28.885)/视野比(701.000±77.149)/视野, t=13.113, P<0.01], 凋亡率实验组高于对照组(87.267±2.616比36.933±5.460, t=14.399, P<0.01)。结论 miR-135a通过调控c-Myc及PAM通路抑制OS细胞的增殖、迁移、侵袭及抗凋亡能力。