多次重复荧光原位杂交制片技术在淋巴瘤诊疗中的应用研究

作者：刘伟; 滕孝静; 毕阔; 周小鸽

来源：临床和实验医学杂志, 2020, 19(13): 1436-1438.

• 淋巴瘤
• 多次重复荧光原位杂交技术
• 诊断

目的建立多次重复荧光原位杂交制片技术,用以在切片不足的情况下辅助淋巴瘤诊疗。方法收集20例包含不同程度的基因断裂、基因扩增情况且诊断为淋巴瘤的石蜡组织,每例连续切片4张。将杂交分为三组:第一次杂交组(FHG):第一次分别杂交C-MYC基因断裂探针、BCL-2基因断裂探针和BCL-6基因断裂探针;第二次杂交组(SHG):取FHG杂交C-MYC基因断裂探针切片,使用重复荧光原位杂交技术再次杂交BCL-2基因断裂探针;第三次杂交组(THG):在第二次杂交基础上再次使用该技术杂交BCL-6基因断裂探针。观察FHG组,SHG组,THG组镜下红绿信号的表达情况:包括红绿信号是否表达及信号的表达模式。记录结果后对三组中孵育相同探针的切片的信号情况进行对比。并且观察三组切片是否保持完整。结果 SHG组镜下出现有效荧光信号比率为100%(R1=20/20×100%),THG组在镜下出现有效荧光信号比率为100%(R2=20/20×100%)。在本次实验中多次重复荧光原位杂交制片技术的成功率为100%(R=R1×R2)。在符合率方面,BCL-2基因断裂探针在FHG组和SHG组具有相同的信号模式和阳性比率;同时BCL-6基因断裂探针在FHG组和THG组也具有相同的信号模式和阳性比率;三组FISH杂交染色中只有两张切片具有部分掉片的情况,但不影响信号判读。证明在该方法下切片具有较好的完整性;该多次重复荧光原位杂交技术具有可行性。结论多次重复荧光原位杂交制片技术可以在一张切片上重复杂交不同探针,且每次均可获得信号清晰、形态较好、背景清晰的FISH染色结果。可以在切片不足的情况下,满足临床诊断、治疗需求。

• 单位
  首都医科大学附属北京友谊医院