新城疫病毒Italien株辅助质粒的构建及功能鉴定

作者：任臻; 尉丁; 南刚; 胡福泉; 陈志南; 边惠洁

来源：Y201207009, 2012, (07): 702-706.

• 新城疫病毒
• 遗传学技术
• 溶瘤病毒
• 重组
• 辅助质粒 newcastle disease virus
• genetic techniques
• oncolytic viruses
• recombinant
• helper pla

目的构建基于T7启动子的含新城疫病毒(NDV)Italien株核衣壳蛋白(NP)、磷酸化蛋白(P)和蛋白(L)基因的表达质粒,作为构建重组NDV所需的辅助质粒。方法将NDV的NP、P和L基因酶切后置于T7启动子和核糖体进入位点序列的下游,分别构建NP、P和L基因的表达质粒,转染BSR-T7/5细胞,采用间接免疫荧光法(IFA)检测病毒蛋白的表达,利用微型基因组(MG-L)质粒检测辅助质粒组装核糖核酸蛋白质复合物(RNP)的功能。结果测序证实辅助质粒构建正确。IFA检测可观察到NP和P基因的表达。与MG-L单转染对照组和空白对照组相比,辅助质粒和MG-L共转染后,报告基因萤火虫荧光素酶得到高效表...

• 单位
  第四军医大学; 中国人民解放军陆军军医大学