摘要
目的 筛选黑色素瘤肿瘤相关抗原AGR2蛋白来源的H-2Kb限制性CTL表位肽,并鉴定其抗肿瘤效应。方法 Westernblot和细胞流式术分别验证AGR2蛋白和H-2Kb基因在小鼠黑色素瘤细胞系B16-F0的表达情况;琼脂糖凝胶电泳筛选得到H-2Kb基因型的小鼠;利用超基序方案SYFPEITHI和IEDB数据库相结合的计算机模拟方法预测得到H-2Kb限制性AGR2-CTL表位肽,并利用分子操作环境(MOE)模拟了H-2Kb限制性AGR2-CTL表位肽与H-2Kb分子的对接,使用Elispot进一步验证其免疫活性。构建小鼠移植瘤模型验证H-2Kb限制性AGR2-CTL表位肽体内抗肿瘤效应,并通过考察小鼠体重、肝肾质量指数、以及血生化指标进行初步安全性评估。结果 AGR2-CTL表位肽AGR24-12能够促进干扰素-γ分泌,提高CD8+T细胞比例,而对CD4+T细胞比例无影响,显著抑制小鼠移植瘤生长,且在小鼠体内并无明显毒性。结论 AGR24-12为H-2Kb限制性AGR2蛋白优势CTL表位肽,且具有显著的体内抗肿瘤效应。
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