固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定人尿液中40种抗生素的残留量

作者：徐新; 孙文芳; 徐杰; 霍翔; 刘祥萍^*

来源：理化检验. B, 化学分册, 2023, 59(05): 591-598.

• 固相萃取
• 超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)
• 抗生素
• 残留量
• 人尿液

取人尿液样品1.00 mL,加入1.0 mg·L-1 13C-红霉素-d3和阿莫西林-d4的混合内标溶液10μL和乙二胺四乙酸二钠(Na2EDTA)-Mcllvaine缓冲液(pH 3.5±0.05) 0.30 mL,涡旋30 s,离心5 min,将上清液以流量1.0 mL·min-1过活化好的Oasis HLB固相萃取柱，抽干柱子后用甲醇3 mL以1.0 mL·min-1流量洗脱柱子，收集全部洗脱液，氮吹至近干，用10%(体积分数)甲醇溶液稀释至0.5 mL,涡旋混匀后过0.22μm有机滤膜，滤液供超高效液相色谱-串联质谱仪分析。40种抗生素(8种磺胺类、6种大环内酯类、8种β-内酰胺类、4种四环素类、9种喹诺酮类、3种氯霉素类、1种林可酰胺类和1种喹喔啉类抗生素)在Kinetex? F5 100A色谱柱(50 mm×3.0 mm, 2.6μm)上用不同体积比的0.1%甲酸(体积分数，下同)溶液和含0.1%甲酸的乙腈溶液的混合溶液进行梯度洗脱分离，用电喷雾离子源负(3种氯霉素类抗生素)、正离子模式电离，用多反应监测(MRM)模式检测，其中红霉素和阿莫西林采用内标法和基质匹配法定量，其他抗生素采用基质匹配法定量。结果表明，红霉素和青霉素V工作曲线的线性范围为1.0～100.0μg·L-1,其余38种抗生素工作曲线的线性范围为1.0～200.0μg·L-1,检出限(3S/N)为0.01～1.25μg·L-1;按标准加入法进行回收试验，回收率为51.0%～128%,测定值的相对标准偏差(n=5)为1.2%～14%。方法用于10份成年人尿液样品的分析，其中9份样品中检出了9种抗生素，检出量为0.09～322.86μg·L-1,其中阿莫西林检出率高达50%,检出量高达322.86μg·L-1。

• 单位
  南京市疾病预防控制中心; 江苏省疾病预防控制中心