摘要

为制备优质高效的小带鱼蛋白抗菌肽,以舟山低值小带鱼为研究对象,以大肠杆菌为指示菌,通过单因素试验优选出胃蛋白酶和木瓜蛋白酶进行复合酶解,经Sephadex G-25凝胶层析分离及反向高效液相色谱纯化,响应面优化得出复合酶解的最佳条件为:复合酶水解时间4.2 h、复合酶解温度36.5℃、复合酶解pH值为4.4;三因素影响作用大小为:复合酶水解时间>复合酶解pH值>复合酶解温度。在此条件下,酶解液的理论最大抑菌率为44.87%,实际抑菌率为44.48%,与响应面优化预测结果相差0.8%,相较于单酶解液抑菌率提髙了24.28%,表明复合酶解后效果提高显著。此时酶解液水解度为32.64%,蛋白质浓度为0.45 mg/mL。酶解液经进一步分离纯化后抑菌率为78.56%,相比较纯化前的酶制剂提髙了77.61%,纯化后抗菌效果显著得到提高。研究结果表明该复合酶法制得的小带鱼蛋白抗菌肽具有良好抗菌效果,该技术对低值小带鱼制备抗菌肽产品的进一步深入研究和应用具有一定的理论指导意义。