双组分转导系统CNX＿RS34865/CNX＿RS34870对安丝菌素生物合成的调控机制研究

作者：张堃钰; 张佩佩; 付加芳; 康妮; 宗工理; 马欣; 张少伟; 曹广祥^*

来源：中国抗生素杂志, 2022, 47(04): 354-360.

DOI：10.13461/j.cnki.cja.007313

• 珍贵束丝放线菌
• 双组分转导系统
• 安丝菌素
• 生物合成
• 转录组测序

目的 探究珍贵束丝放线菌(Actinosynnema pretiosum)中双组分转导系统CNX＿RS34865/CNX＿RS34870对A. pretiosum中安丝菌素P-3(AP-3)生物合成的调控机制。方法 本研究以A. pretiosum X47菌株为出发菌株,构建双组分转导系统CNX＿RS34865/CNX＿RS34870中调控基因CNX＿RS34870的缺失突变菌株;利用HPLC分析及生物活性测定分析出发菌株X47与CNX＿RS34870突变菌株(ΔRS34870)的AP-3产量差异;利用转录组测序分析菌株之间各基因的转录水平差异,分析CNX＿RS34870对菌株AP-3生物合成的影响及作用机制。结果 与出发菌株X47相比,ΔRS34870菌株在液体发酵条件下AP-3生物合成量显著下降,在第6天时,ΔRS34870菌株AP-3产量降低了36.94%。转录水平分析显示ΔRS34870菌株中1524个基因的转录较X47明显不同,其中AP-3生物合成基因簇中的asm1、asm2、asm30、asm32、asm33、asm34、asm35和asm37基因以及与初级代谢中与AP-3前体合成相关的pgk基因出现了显著下调。结论 CNX＿RS34870是菌株AP-3生物合成的正调控基因,可通过调控AP-3生物合成基因簇的转录以及影响初级代谢从而影响AP-3的产生。本研究将为了解AP-3生物合成的调控网络以及工业菌株的遗传改造提供理论指导。

• 单位
  山东省医学科学院; 山东第一医科大学