德尔卑沙门氏菌分子等温活菌检测体系的建立

作者：翟立公; **; 李港回; 王俊颖^*

来源：微生物学通报, 2022, 49(03): 1214-1223.

DOI：10.13344/j.microbiol.china.210769

• 德尔卑沙门氏菌
• 重组酶聚合酶扩增
• 叠氮溴化丙锭
• 特异性基因

【背景】德尔卑沙门氏菌(Salmonella enterica subsp.enterica Derby)是危害人类生命安全的主要致病性血清型。【目的】建立一种准确、快速检测德尔卑沙门氏菌的方法。【方法】通过建立叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)-重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)的方法准确有效地检测样品中的活德尔卑沙门氏菌。【结果】使用基因RU61＿00441作为检测靶点，设计引物SD1正确地鉴定了所有被测菌株。实验结果表明，PMA处理能有效区分活细胞和死细胞。基因组DNA检测限为761.2 fg/μL，活菌检测限为45 CFU/m L。此方法检测德尔卑沙门氏菌的血清型不受自然背景(猪肉、鸡肉和牛肉)菌群基因组DNA的影响。此外，该方法还可以检测出动物性食品中富集6 h后浓度低至3.9 CFU/m L的德尔卑沙门氏菌。【结论】这种PMA-RPA检测方法耗时短并具有更好的灵敏度和特异性，能为沙门氏菌的检测提供更有效的指导。

• 单位
  安徽科技学院