红花清肝十三味丸通过抑制JNK/c-Jun信号通路减轻大鼠急性肝损伤的研究

作者：卢任玲; 金蓉; 张子英; 龚延萍; 马丽杰^*

来源：中药药理与临床, 2021, 37(03): 21-26.

DOI：10.13412/j.cnki.zyyl.2021.03.005

• 红花清肝十三味丸
• 急性肝损伤
• 氨基末端激酶
• 凋亡

目的:研究红花清肝十三味丸治疗急性肝损伤的作用机制。方法:48只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、水飞蓟宾0.1 g/kg组和红花清肝十三味丸0.25、0.5、1.0 g/kg组,1次/d,连续灌胃给药8 d。末次给药1 h后,正常对照组大鼠腹腔注射1 m1/kg花生油,其余各组注射同等体积CCl4-花生油溶液建立急性肝损伤模型。生化法检测大鼠血清谷草转氨酶(AST)、谷胱甘肽(GSH)活力,Elisa法检测肝组织总抗氧化力(T-AOC)活力;TUNEL法观察大鼠肝细胞凋亡;Western blot法检测大鼠肝脏c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、p-c-Jun蛋白表达;Western blot法和O-RT PCR法分别检测死亡相关因子配体(FasL)、死亡相关因子(Fas)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)、B淋巴细胞瘤-2 (BCL-2)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、细胞色素C(Cytochrome C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白-9(Caspase-9)的蛋白和mRNA表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠血清AST活力显著升高(P<0.01),血清GSH及肝脏T-AOC活力显著降低(P<0.01),TUNEL染色结果显示,模型对照组小叶中心带大部肝细胞核呈阳性,可见大量凋亡小体,部分已被Kupffer细胞吞噬;模型对照组大鼠肝脏p-JNK、p-c-Jun蛋白表达及p-JNK/JNK较正常对照组升高(P<0.01),FasL、Fas、Caspase-8、Bax、Cytochrome C、Caspase-9的蛋白和mRNA表达上调,而BCL-2的蛋白和mRNA表达下调(P<0.01)。与模型对照组比较,红花清肝十三味丸各组大鼠血清AST水平,肝脏p-JNK、p-c-Jun蛋白表达,p-JNK/JNK及FasL、Fas、Bax、Cytochrome C、Caspase-8、Caspase-9的蛋白和mRNA表达均明显下调(P<0.05),而血清GSH活力明显升高及肝脏BCL-2的蛋白和mRNA表达明显上调(P<0.05);此外,红花清肝十三味丸0.5、1.0 g/kg组大鼠肝组织T-AOC活力显著升高(P<0.01);TUNEL染色显示,红花清肝十三味丸各剂量组均不同程度减少凋亡小体的形成,抑制肝细胞凋亡,且红花清肝十三味丸1.0g/kg组效果最佳。结论:红花清肝十三味丸改善急性肝损伤的作用机制可能是通过抑制JNK/c-Jun信号通路的活化,调节下游凋亡基因和蛋白的表达来实现的。

• 单位
  内蒙古医科大学; 山东药品食品职业学院; 基础医学院