胎盘生长因子串联scFv质粒构建表达及亲和力测定

作者：闫若辰; 王文皓; 魏琳纳; 袁玉华^*

来源：天津医科大学学报, 2023, 29(01): 78-82.

• 胎盘生长因子
• 串联scFv
• scFv
• 亲和力

目的：构建并表达胎盘生长因子串联scFv，提升对胎盘生长因子的亲和力。方法：设计不同长度的柔性连接子连接的串联scFv，构建串联scFv质粒，并分别将串联scFv与亲本scFv于原核表达系统进行表达。通过间接ELISA分别测定串联scFv及对应亲本scFv亲和力，分别对数据进行单因素ANOVA方差分析，并使用Dunnett-t检验进行组间比较。结果：柔性连接子长度的不同，会对串联scFv亲和力造成差别。单因素ANOVA方差分析结果表明，各组亲和常数间存在明显的统计学差异，Dunnettt检验组间比较结果可知，当串联scFv间柔性连接子(GGGGS)n长度n=4和n=5时，亲和力较亲本提升不明显(P>0.05)；但亲和力在n=6(t335=33.90,t7A10=32.00，均P<0.000 1)及n=7(t335=91.68,t7A10=90.71，均P<0.000 1)时较两亲本均有明显提升。结论：串联scFv可以明显提高单体scFv亲和力。

• 单位
  中国医学科学院血液病医院; 天津医科大学总医院