科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的评价外泌体在M2型小胶质细胞减轻星形胶质细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤中的作用。方法体外培养原代星形胶质细胞至对数生长期, 采用随机数字表法分为5组(n=14):对照组(C组)、氧糖剥夺-复糖复氧组(O组)、氧糖剥夺-复糖复氧+M2型小胶质细胞组(O+M2组)、氧糖剥夺-复糖复氧+M2型小胶质细胞+GW4869组(O+M2+G组)和氧糖剥夺-复糖复氧+M2型小胶质细胞源性外泌体组(O+M2-E组)。C组在正常条件下培养, O组氧糖剥夺4 h, 复糖复氧24 h;O+M2组氧糖剥夺4 h, 复糖复氧时加入M2型小胶质细胞的上清液2 ml培养24 h;O+M2+G组氧糖剥夺4 h, 复糖复氧时加入经外泌体抑制剂GW4869 10 μmol/L处理后的M2型小胶质细胞上清液2 ml培养24 h;O+M2-E组氧糖剥夺4 h, 复糖复氧时加入M2型小胶质细胞源性外泌体10 μg/ml培养24 h。光镜下观察细胞形态变化, 采用CCK-8法检测细胞活力, qRT-PCR法检测水通道蛋白4(AQP4)mRNA表达水平, Western blot法检测AQP4及胀亡蛋白porimin的表达水平。结果与C组相比, 其余4组细胞活力下降, AQP4及其mRNA、porimin表达上调(P<0.05), 细胞发生水肿;与O组相比, O+M2组和O+M2-E组细胞活力升高、AQP4及其mRNA和porimin表达下调, O+M2+G组上述指标差异无统计学意义(P>0.05), 细胞水肿程度减轻;与O+M2组相比, O+M2+G组细胞活力下降, AQP4及其mRNA和porimin表达上调(P<0.05), O+M2-E组上述指标差异无统计学意义(P>0.05), 细胞水肿程度增强。结论 M2型小胶质细胞可通过外泌体减轻星形胶质细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤。
- 单位
