摘要
【目的】制备猪源A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗,有效控制巴氏杆菌病的发生和流行。【方法】从发病猪病料中分离猪源A型多杀性巴氏杆菌,测定生长曲线,通过小鼠致病性试验筛选疫苗候选菌株。将筛选得到的疫苗候选菌株培养后进行灭活,无菌检验合格后,按1∶4的比例与SUMMIT-CB-200佐剂混合,制备猪源A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗。最后通过小鼠和仔猪免疫攻毒保护试验评估疫苗保护力。【结果】分离到11株猪源A型多杀性巴氏杆菌;生长曲线测定结果显示,11株菌均在培养至6 h时达到生长稳定期,活菌数范围为2.1×109~8.4×109 CFU/mL;小鼠致病性试验结果显示,攻毒后小鼠出现精神沉郁、食欲降低、行动迟缓、被毛粗糙、扎堆、眼睛周围大量脓性分泌物、腹式呼吸、共济失调等症状,共筛选到A4、A8、A9和A11 4株疫苗候选菌株,其中最强毒株A4小鼠皮下攻毒半数致死量(LD50)为167 CFU;仔猪毒力试验结果显示,攻毒后仔猪出现精神沉郁、食欲降低、皮肤发红、呕吐、呼吸困难、腹式呼吸、体温升高、关节肿大、跛行等症状,A4菌株仔猪皮下攻毒LD50为1.72×1010 CFU;免疫攻毒保护试验结果显示,4株猪源A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗对小鼠和仔猪均具有一定保护力,其中A9保护力最强,对小鼠保护率达60%,对仔猪保护率达75%。【结论】本研究制备的灭活疫苗能对猪源A型多杀性巴氏杆菌强毒株提供较好的免疫保护力,具有一定的开发价值。
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单位武汉科前生物股份有限公司