基于吖啶酯-磁微球的自动化学发光免疫法检测赭曲霉毒素A

作者：林健聪; 梁科; 柳彬; 吴民富; 罗林; 雷红涛; 沈玉栋; 徐振林^*

来源：现代食品科技, 2023, 39(03): 313-322.

DOI：10.13982/j.mfst.1673-9078.2023.3.0369

• 牛奶
• 赭曲霉毒素A
• 真菌毒素
• 化学发光免疫分析法

该研究建立了一种基于吖啶酯-磁微球的自动化学发光免疫法(Chemiluminescence Immunoassay,CLIA)检测牛奶中的赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)。采用磁微球偶联二抗，吖啶酯标记OTA-BSA偶联物，优化了磁微球浓度、OTA抗体浓度、吖啶酯标记物浓度、抗体和标记物稀释液、反应时间、样品预处理条件等各种CLIA方法的试验条件。结果表明，CLIA方法对OTA的检出限为6.38 ng/kg，半抑制浓度(IC50)为31.40 ng/kg，线性范围为11.23～99.20 ng/kg，批内和批间的变异系数<8%；测定牛奶样品中的OTA时，检出限为25.52 ng/kg,IC50为125.60 ng/kg，线性范围为44.92～396.80 ng/kg，添加回收率为95.08%～105.83%；对赭曲霉毒素B、赭曲霉毒素C的交叉反应率为6.52%和24.57%，对其他真菌毒素均无明显的交叉反应；对牛奶样品的检测结果与高效液相色谱-串联质谱法一致；且CLIA方法的试剂能在2～8℃稳定保存9个月以上。该研究建立的CLIA方法，具有灵敏、准确、快速和操作便捷等特点，检测时长仅30 min，尤其适用于大规模牛奶样品中OTA残留的快速筛查。

• 单位
  佛山职业技术学院; 华南农业大学