急性氧化应激初期人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30抗氧化作用的研究

作者：韩子豪; 李松蔓; 李艳玮; 陈曦; 张鸿侃; 蒋林志; 梁皓^*

来源：眼科新进展, 2019, 39(02): 109-112.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2019.0025

• 急性氧化应激
• 人晶状体上皮细胞
• 衰老标记蛋白30
• 超氧化物歧化酶
• 谷胱甘肽

目的初步探讨衰老标记蛋白30(senescence marker protein 30,SMP30)的增加对处于急性氧化应激初期的人晶状体上皮细胞株SRA01/04的保护作用。方法将处于对数生长期的SRA01/04接种于96孔板,分别使用含150μmol·L-1、200μmol·L-1、250μmol·L-1、300μmol·L-1、350μmol·L-1、400μmol·L-1、450μmol·L-1H2O2的培养基作用2 h,CCK-8法选取最佳H2O2浓度;使用慢病毒对SRA01/04进行转染建立SMP30高表达模型,实验分3组:SMP30过表达(overexpression,OE)组、SMP30过表达相应空载(negative control over expression,NCOE)组及对照(control,CON)组。通过超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)定量检测试剂盒、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)/总谷胱甘肽(total glutathi-one,T-GSH)测定试剂盒测量细胞内SOD活力及GSSG/T-GSH比值的变化。结果经分析,建立模型的最佳H2O2浓度为300μmol·L-1。在此浓度下,与CON组(5. 783±0. 192) U·mg-1及NCOE组(5. 837±0. 182) U·mg-1相比,OE组细胞内SOD活力升高,为(10. 251±0. 110) U·mg-1;与CON组(29. 943±0. 241)及NCOE组(30. 037±0. 433)相比,OE组细胞内GSSG/T-GSH比值(20. 990±0. 342)降低;差异均有统计学意义(均为P <0. 05)。结论当SRA01/04处于H2O2诱导的急性氧化应激初期时,SMP30表达的增加可通过增加SOD活力和降低GSSG/T-GSH比值,加强SRA01/04的抗氧化能力。

• 单位
  广西医科大学第一附属医院