摘要
目的探讨ExoQuick法提取人血清外泌体的方法及临床价值。方法选取2016年1月至2018年1月在该院体检的健康受试者50例,清晨抽取受试者空腹外周静脉血4mL,标本分成2等份,分别采用超迷离心法、ExoQuick法检测人血清外泌体。比较两种方法的检测时间以及投射电镜、BCA蛋白定量、western blot的检测结果。结果透射电镜检查发现,超迷离心法提取的人血清外泌体外形较圆,为类圆形或椭圆形囊泡状,绝大多数囊泡外周能观察到膜性结构,聚集形态既可单个分布,又可聚集成落,内部可见低电子密度物质,人血清外泌体直径分布在30~100nm,背景清晰。ExoQuick法提取的人血清外泌体外形多为椭圆形,密度均匀,直径30~50nm,背景干净、清晰。ExoQuick法提取的人血清外泌体BCA蛋白水平[(115.59±0.84)g/L]显著高于超迷离心法[(20.69±0.57)g/L,t=52.361,P<0.05]。超迷离心法最长提取时间是66min,最短提取时间是60min,平均提取时间为(63.58±1.25)min。ExoQuick法最长提取时间是60min,最短提取时间是52min,平均提取时间为(55.62±1.20)min。ExoQuick法提取的人血清外泌体的时间少于超迷离心法(P<0.05)。结论 ExoQuick法提取人血清外泌体方便、有效,能快速提取微小人血清外泌体、提高蛋白检出量,且对CD63敏感,可推荐使用。
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单位武汉市第三医院