摘要
目的 建立创伤弧菌(Vibrio vulnificus,V. vulnificus)经呼吸道早期感染小鼠模型,为相关的防治策略提供参考依据。方法 24只8~10周龄健康雌性BALB/c小鼠,随机分为对照组、低浓度感染组、中浓度感染组和高浓度感染组,每组6只。采用滴鼻法建立低、中、高浓度V. vulnificus感染的小鼠模型。在0~12 h感染早期进程中观察小鼠的生存、排便情况、毛发色泽、咳喘和精神状态等指标;取小鼠不同系统的重要器官进行HE染色观察病理表现,采用免疫组织化学染色法检测靶器官中白细胞介素(IL)-6、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化;使用小鼠炎性多因子检测试剂盒结合流式细胞术检测血清中致炎—抑炎因子谱的变化情况。结果 V. vulnificus经呼吸道感染12 h内即可引起小鼠生存、排便、毛发、呼吸道和精神状态改变。HE染色病理分析结果显示,不同浓度感染组小鼠回肠、肺、肝和脾均出现炎性细胞浸润、细胞坏死等损伤表现,且高浓度感染组损伤表现更严重。免疫组织化学结果显示,中、高浓度感染组小鼠回肠、肺、肝和脾中IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α的阳性表达率均明显高于对照组(P<0.05)。高通量多因子检测结合流式细胞术结果显示,与对照组比较,低、中、高浓度感染组TNF-α、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1表达水平均明显增高(P<0.05),IL-27表达水平均明显降低(P<0.05);中、高浓度感染组IL-1β、IL-6、IL-17A、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)表达水平均明显增高(P<0.05);高浓度感染组IL-1α、IL-23、IL-12p70、IFN-γ表达水平均明显增高(P<0.05)。结论 V. vulnificus经小鼠呼吸道感染早期进展迅速,肺、肠、肝和脾是主要靶器官,同时血清中多种炎性因子分泌增多,可引起机体严重炎性反应。
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单位中心实验室; 华南理工大学; 解放军总医院