HSV-1 stocker株糖蛋白G基因膜外区毕赤酵母表达载体的构建及序列分析

作者：刘毅; 韩金祥; 邵金辉; 朱波; 朱有名

来源：中国生物制品学杂志, 2006, 19(02): 146-149.

DOI：10.3969/j.issn.1004-5503.2006.02.012

• 单纯疱疹病毒Ⅰ型
• 包膜糖蛋白G
• 毕赤酵母

目的构建Ⅰ型单纯疱疹病毒型特异性包膜糖蛋白G基因膜外区毕赤酵母表达载体,并进行序列分析。方法PCR扩增HSV-1-gG基因的膜外区,克隆于pGEM-T载体,转化DH5α,提取质粒酶切鉴定后,与pPIC9K载体连接,转化DH5α,筛选阳性克隆,鉴定后转化GS115菌,构建酵母表达载体。对克隆的序列进行分析,预测表达产物的理化特性、抗原性及表达形式。结果获得的重组酵母表达载体pPIC9K-gG,测序结果证实为HSV-1-gG基因,序列分析其高度保守,预测蛋白相对分子质量15870,等电点pI为4.72,包含全部膜外区分值达1.7的6个强抗原决定簇,将以可溶性形式分泌表达于胞外。结论已成功构建HSV-1stocker株糖蛋白G基因膜外区毕赤酵母表达载体。

• 单位
  山东大学