鉴别感染羊驼4种病毒多重PCR检测方法的建立

作者：于远光; 岳涛; 马晓宁; 张永兴^*; 王萌; 曾巧英; 刘艳红; 高闪电; 独军政; 吴锦艳; 李坤; 许小红

来源：中国兽医科学, 2023, 53(09): 1102-1107.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0148

• 羊驼
• 口蹄疫病毒
• 羊口疮病毒
• 蓝舌病病毒
• 牛病毒性腹泻病毒
• 多重PCR

为了建立一种用于羊驼易感的羊口疮病毒(ORFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV-1)、口蹄疫病毒(FMDV)、蓝舌病病毒(BTV)鉴别的多重PCR检测方法，根据GenBank中公布的ORFV、BVDV-1、FMDV和BTV参考株基因序列分别设计特异性引物，优化引物、dNTP、Taq DNA聚合酶浓度及退火温度，通过敏感性和重复性检验，并对60份羊驼粪便样品和35份羊驼咽拭子样品进行验证。结果显示，所建立的多重PCR方法能够有效区分ORFV、BVDV-1、FMDV和BTV，最低检测限分别为3.18×104copies/μL、3.13×101copies/μL、3.06×101copies/μL、2.95×102copies/μL。结论：所建立的多重PCR方法能够同时快速鉴别羊驼感染的ORFV、BVDV-1、FMDV和BTV，具有较高的应用价值。

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 甘肃农业大学; 甘肃省疾病预防控制中心