RNA干扰沉默HIF-1α基因对舌癌Tca8113细胞侵袭和迁移的影响

作者：徐香兰; 韩冰; 钟启平; 王丽; 燕杰

来源：山东医药, 2013, 53(43): 5-8.

DOI：10.3969/j.issn.1002-266X.2013.43.002

• RNA干扰
• 缺氧诱导因子-1α
• 舌肿瘤
• 舌癌细胞
• 肿瘤侵袭
• 肿瘤迁移
• 上皮—间质转化
• 黏着斑激酶

目的观察RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因对人舌癌细胞Tca8113侵袭和迁移的影响。方法将3个shRNA序列质粒导入pGCsi-H1/Hygro/GFPshRNA质粒表达载体,并将重组质粒经脂质体介导转染人舌癌细胞Tca8113(siHIF-1α组),转染阴性对照质粒的细胞作为空载组。半定量RT-PCR及Western blot法检测HIF-1α的mRNA及蛋白,细胞侵袭实验和划痕实验检测Tca8113的侵袭和迁移能力,同时采用Western blot法检测其上皮—间质转化(EMT)相关标志蛋白和黏着斑激酶(FAK)、磷酸化FAK(P-FAK)。结果测序证实成功构建了HIF-1αshRNA重组质粒(分别为sh1、sh2、sh3),将sh3,转染Tca8113后进行低氧培养,HIF-1α基因表达显著被抑制。与空载组相比,转染sh3的siHIF-1α组穿透Matrigel胶的细胞数明显减少,且迁移能力也显著下降,两组相比,P均<0.05。与对照组(未转染质粒的Tca8113)相比,siHIF-1α组EMT相关标志蛋白和p-FAK蛋白表达下降,两组相比,P均<0.05。结论 RNA干扰沉默HIF-1α基因能有效抑制舌癌细胞的侵袭和迁移,在一定程度上可以逆转舌癌细胞的恶性表型。

• 单位
  天津市第三中心医院; 天津医科大学; 天津医学高等专科学校