马抗中东呼吸综合征冠状病毒特异性F(ab’)_2的制备

作者：邱泊宁; 胡星星; 闫飞虎; 王翀; 崔健男; 盖微微; 曹增国; 王化磊; 赵永坤^*; 杨松涛^*; 夏咸柱

来源：中国生物制品学杂志, 2019, 32(02): 173-180.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.001882

• 中东呼吸综合征
• 冠状病毒
• 病毒样颗粒
• 免疫亲和层析
• 免疫球蛋白
• F（ab’）2

目的采用免疫亲和层析技术纯化制备马抗中东呼吸综合征冠状病毒（Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV）特异性IgG与F（ab’）2。方法以经MERS-Co V病毒样颗粒（virus-like particles,VLPs）对马匹进行多次免疫所制备的高免血清为原料,原核表达的MERS-CoV刺突蛋白S受体结合域（S-receptor binding domain,S-RBD）为抗原蛋白制备免疫亲和柱,提取制备抗原特异性IgG或F（ab’）2。间接ELISA法检测各样品的活性,MERS假病毒中和试验检测样品的中和活性,BCA法测定样品的浓度,并计算收率。结果所制备的特异性IgG与特异性F（ab’）2的纯度分别为90. 1%和92. 8%,收率分别为8. 7%和3. 07%;在相同的浓度下,所制备的特异性IgG或F（ab’）2的活性和中和活性均高于对照组中的血清总Ig G或总F（ab’）2。结论成功制备了马抗MERS-CoV特异性IgG或F（ab’）2,为建立更加安全与高效的抗MERS-CoV免疫球蛋白F（ab’）2制备工艺奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 军事医学科学院军事兽医研究所; 吉林大学; 吉林农业大学; 动物科技学院; 东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室