摘要

目的研究三氧预处理对大鼠脑缺血/再灌注(I/R)损伤的作用。方法选择24只清洁级雄性SD大鼠, 按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、脑I/R损伤组(I/R组)和三氧预处理组(Ozone组), 每组8只。各组大鼠均常规喂养, Ozone组给予腹腔注射80 mg/L三氧水(剂量为0.01 mL/g)预处理, Sham组和I/R组分别输注等体积0.9%生理盐水;每日1次, 共注射5 d。之后I/R组与Ozone组采用线栓法制备大鼠脑I/R模型, Sham组只分离不结扎动脉。缺血2 h后, 测定大鼠神经功能缺损评分(NDS);再灌注24 h后, 测定改良神经功能缺损评分(mNSS);并麻醉大鼠取脑组织, 采用2, 3, 5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色观察大鼠的脑梗死情况, 计算脑梗死体积占比;另外采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)测定脑缺血半暗带区代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)和离子型谷氨酸α-氨基-3-羟基-5甲基-4异恶唑丙酸受体(AMPAR)亚基GluA2的蛋白表达。结果与Sham组相比, I/R组大鼠的NDS评分、mNSS评分和脑梗死体积占比均明显升高〔NDS评分(分):2.63±0.52比0, mNSS评分(分):9.63±1.19比1.13±0.64, 脑梗死体积占比:(41.25±2.93)%比0%, 均P<0.05〕, 脑缺血半暗带区mGluR5和GluA2的蛋白表达水平均明显降低mGluR5蛋白(mGluR5/β-actin):0.44±0.14比1.00±0.10, GluA2蛋白(GluA2/β-actin):0.23±0.08比1.00±0.25, 均P<0.05;与I/R组相比, Ozone组大鼠mNSS评分和脑梗死体积占比均明显降低〔mNSS评分(分):7.00±1.20比9.63±1.19, 脑梗死体积占比:(27.23±6.21)%比(41.25±2.93)%, 均P<0.05〕, 脑缺血半暗带区mGluR5和GluA2的蛋白表达水平均明显升高mGluR5蛋白(mGluR5/β-actin):0.81±0.10比0.44±0.14, GluA2蛋白(GluA2/β-actin):0.76±0.13比0.23±0.08, 均P<0.05。结论三氧预处理可减轻大鼠脑I/R损伤, 其机制可能与脑缺血半暗带区GluR5和GluA2蛋白表达上调有关。