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摘要
目的：构建辅酶NADPH高效再生的基因工程菌，获得辅酶NADPH高效再生的最佳工艺条件。方法：利用基因工程技术将辅酶NADPH再生关键酶的基因glk和zwf导入到大肠杆菌BL21中，实现辅酶NADPH循环高效再生，并优化辅酶NADPH再生的工艺条件。结果：成功构建了含有辅酶NADPH再生关键酶两个基因的重组大肠杆菌BL21/pETDuet-1-glkzwf；通过正交设计优化试验，获得重组工程菌株产辅酶NADPH的最佳工艺条件是：诱导温度20℃、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷浓度0.25 mmol/L、接种量1.5%、装液量100 mL/250 mL。在此条件下进行1 L发酵摇瓶诱导培养48 h，辅酶NADPH产量高达151.79μmol/L。结论：研究结果为辅酶NADPH循环再生提供了良好的理论基础。
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单位浙江工商大学; 食品与生物工程学院
