百脉根泛素结合酶LjE2的表达及活性鉴定

作者：刘超; 冯勇; 董笑笑; 张忠明; 朱辉^*

来源：华中农业大学学报, 2019, 38(01): 22-27.

DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2019.01.004

• 百脉根
• 泛素结合酶
• 体外泛素化
• 原核表达系统

为了研究泛素化作用在豆科植物共生固氮过程中的调控功能和作用机制,利用拟南芥泛素结合酶E2的序列,在百脉根基因组上鉴定得到14个编码E2(LjE2)的基因,从LjE2中克隆到11个基因并构建了融合表达载体pET-LjE2s:His。通过大肠杆菌表达系统,表达并纯化到10个LjE2:His融合蛋白。经体外泛素化及Western blot分析,在10个LjE2中有9个具有泛素结合酶活性,1个(LjE2-5)未检测到泛素结合酶活性。

• 单位
  农业微生物学国家重点实验室; 华中农业大学; 生命科学技术学院