维生素A缺乏调节肺泡巨噬细胞M1极化在新生大鼠ARDS中的作用及其机制

作者：曾毅文; 龚放^*

来源：解放军医学杂志, 2023, 48(10): 1144-1152.

• 维生素A缺乏
• 新生儿
• 急性呼吸窘迫综合征
• 肺泡巨噬细胞M1极化
• 氧化应激
• 炎性因子

目的 探讨维生素A缺乏(VAD)调节肺泡巨噬细胞极化在新生大鼠急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中的作用及其机制。方法 将60只新生SD大鼠分为维生素A正常对照组(VAN ctrl组，n=10)、维生素A正常组(VAN组，n=10)、维生素A缺乏对照组(VAD ctrl组，n=10)、维生素A缺乏组(VAD组，n=10)、维生素A挽救对照组(VADR ctrl组，n=10)及维生素A挽救组(VADR组，n=10)，其中，VADR ctrl及VADR组SD大鼠于生后第2天一次性给予腹腔注射25μg VA。6组新生大鼠分别予以脂多糖(LPS)建立ARDS新生大鼠模型并收集血清及肺组织标本。记录建模前各组新生大鼠的体重，采用May-Grunwald-Giemsa染色法检测肺泡灌洗液(BALF)中主要细胞数量，HE染色观察肺组织病理损伤情况，免疫荧光染色评估肺泡巨噬细胞极化情况，qRT-PCR、ELISA检测肺泡巨噬细胞极化下游标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-10、精氨酸酶1(Arg-1)等炎性因子的表达情况，比色法检测肺组织氧化应激标志物超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量，TUNEL检测细胞凋亡情况。结果 与VAN组新生大鼠比较，VAD组新生大鼠体重较轻、体格偏小、毛发稀疏，而VADR组新生大鼠体重、一般情况无明显变化；与VAD组比较，VADR组新生大鼠体重增加，毛发光亮。与VAN组比较，VAD组ARDS新生大鼠肺部损伤加重，BALF中主要细胞数量增加、肺泡巨噬细胞M1极化激活(P<0.05),M1极化标志物i NOS、IL-6、TNF-α、CD86表达水平明显升高(P<0.05)，氧化应激标志物MDA含量增多(P<0.05)，细胞凋亡增加(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05)，而IL-10、Arg-1水平差异无统计学意义(P>0.05)；与VAN组相比，VADR组新生大鼠巨噬细胞M1极化及TNF-α、IL-6、SOD、MDA、IL-10、Arg-1水平等差异均无统计学意义(P>0.05)；与VAD组比较，VADR组ARDS新生大鼠肺部损伤明显减轻，肺泡巨噬细胞数量及肺泡巨噬细胞M1极化减少(P<0.05)，且M1极化标志物iNOS、IL-6、TNF-α、CD86表达水平降低(P<0.05)，氧化应激标志物MDA含量及细胞凋亡减少(P<0.05),SOD活性增加(P<0.05)。结论 VAD可通过调节肺泡巨噬细胞M1极化，上调M1极化下游炎症标志物表达，增加肺部氧化应激及细胞凋亡，从而加重新生大鼠ARDS的肺部损伤。

• 单位
  重庆医科大学附属永川医院