高效液相色谱法测定心肌肽中组胺含量的可行性分析

作者：矫建; 张婷婷; 杜娟; 刘进朋; 鲁军

来源：大连医科大学学报, 2016, 38(03): 228-231.

• 降压物质
• 心肌肽
• 组胺
• 高效液相色谱法
• 丹磺酰氯柱前衍生法

目的建立和验证高效液相色谱(HPLC)测定心肌肽中组胺含量的方法。方法采用多道生理记录仪记录受试样品致猫血压下降情况。用丹磺酰氯柱前衍生化高效液相色谱法测定心肌肽中组胺含量,心肌肽溶液经三氯乙酸沉淀后,取上清液以丹磺酰氯丙酮溶液为衍生化试剂,衍生化后进行高效液相色谱测定。色谱条件为:色谱柱C18柱(250 mm×4.6 mm,i.d.,5μm),以水-乙腈为流动相梯度洗脱,检测波长254 nm,并对此方法进行方法学考察(标准曲线的绘制、加标、回收率、精密度重复性、专属性)。分析样品中组胺含量与致猫血压下降值之间的相关性。结果 15号样品dT/dS值分别为(0.22±0.07,0.74±0.07,0.91±0.03,0.93±0.10,1.16±0.05)均为合格产品。组胺对照品在0.110μg/m L范围内线性关系良好,相关系数(r)>0.996,检出限为0.03μg/m L,平均加标回收率>91.1%。日内与日间精密度RSD均<1.0%,重复性及专属性均符合生物样品分析要求。SPSS软件分析心肌肽中组胺的含量与降压物质检查法中降压反应比值(dT/dS)成良好的线性相关(r=0.974,P=0.036)。结论采用HPLC法测定心肌肽溶液中组胺的含量,并结合降压反应比值(dT/dS)设定组胺含量的限值可能成为控制心肌肽原料药质量的良好方法。

• 单位
  大连市第二人民医院; 大连市药品检验所