补肾解毒方调控肿瘤相关巨噬细胞M2极化对大肠癌转移的影响

作者：刘静雯; 王瑜; 冯媛媛; 贾茹; 孙筱婷; 王炎; 李琦^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2022, 28(17): 60-66.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221025

• 补肾解毒方
• 肿瘤微环境
• M2型巨噬细胞
• 大肠癌
• 侵袭转移

目的：探讨补肾解毒方调控肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）极化对大肠癌转移的影响。方法：构建C57BL/6小鼠大肠癌皮下移植瘤模型，随机分为正常组、补肾解毒方低、高剂量（11.2、22.4 g·kg-1）组，待肿瘤生长至1.5～2.0 cm3时剥离瘤体。剥离瘤体28 d后处死小鼠，观察小鼠肺转移情况。苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肺组织病理学变化，免疫荧光（IF）染色检测肺转移灶肿瘤细胞缺氧、凋亡变化；流式细胞术检测肿瘤组织中M1型和M2型巨噬细胞分群比；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织中M2型巨噬细胞（M2-TAMs）极化相关基因（Arg1、CD206、CD163）的表达。结果：正常组、补肾解毒方低、高剂量组小鼠转移率分别为70%、40%、10%。与正常组比较，补肾解毒方低、高剂量组转移率均降低，证明补肾解毒方抑制小鼠肺转移；HE染色表明，与正常组比较，补肾解毒方低、高剂量组肺转移灶中肿瘤细胞浸润显著减少（P<0.01）；免疫荧光染色结果表明，与正常组比较，补肾解毒方低、高剂量组肺转移灶中肿瘤细胞凋亡增多、缺氧环境改善；Real-time PCR结果显示，与正常组比较，补肾解毒方低、高剂量组肿瘤组织中M2型巨噬细胞极化基因（Arg1、CD206、CD163）表达显著下降（P<0.01）；流式细胞术显示，与正常组M2型巨噬细胞分群率为34.867%，补肾解毒方低、高剂量组M2型巨噬细胞分群率分别为22.033%、11.633%，显著降低（P<0.01）；与补肾解毒方低剂量组比较，补肾解毒方高剂量组M2型巨噬细胞分群率显著降低（P<0.01），证明补肾解毒方显著抑制肿瘤组织内M2型巨噬细胞激活，且呈剂量依赖性。结论：补肾解毒方通过抑制肿瘤组织中M2型巨噬细胞激活抑制小鼠大肠癌肺转移。

• 单位
  上海中医药大学; 上海中医药大学附属曙光医院