儿茶素清除超氧阴离子对Ang Ⅱ诱导的内皮祖细胞NO与eNOS表达及凋亡影响

作者：吴丽元; 党西强; 何小解; 易著文

来源：中国当代儿科杂志, 2009, (06): 476-480.

• 儿茶素
• 血管紧张素Ⅱ
• 内皮祖细胞
• 超氧阴离子
• 一氧化氮
• 大鼠

目的探讨儿茶素通过清除超氧阴离子(O2·—)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的内皮祖细胞(EPCs)、一氧化氮(NO)与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达及凋亡的影响。方法分离Sprague-Dawley大鼠骨髓内皮祖细胞,将其分为对照组、Ang Ⅱ组与Ang Ⅱ+儿茶素组,培养48h。实验末,利用NBT还原法测定培养上清O2.—浓度、硝酸还原酶法测定培养上清NO浓度;TUNEL法测定EPCs凋亡率;RT-PCR测定eNOS mRNA表达;West-ernblot测定eNOS蛋白表达。结果MTT实验确定10-6mol/LAng Ⅱ为实验细胞诱导浓度,400mg/L儿茶素为实验干预剂量。实验末,对照组、Ang Ⅱ组及Ang Ⅱ+儿茶素组的凋亡率别为(24.8±1.2)‰,(541.8±7.7)‰,(168.7±3.5)‰,三组间差异有非常显著性(P<0.01);对照组、Ang Ⅱ组及Ang Ⅱ+儿茶素组细胞培养上清O.2—分别为(33.7±2.8)、(81.7±3.6)、(62.3±2.2)U/L,NO分别为(105.8±9.8)、(189.8±9.0)、(276.4±10.1)μmol/L,Ang Ⅱ组与Ang Ⅱ+儿茶素组细胞培养上清中O.2—及NO浓度较对照组均有非常显著增高(P<0.01)。Ang Ⅱ+儿茶素组浓度与Ang Ⅱ组相比则有明显降低(P<0.05),但NO浓度则明显增高(P<0.05)。与对照组相比,Ang Ⅱ组与Ang Ⅱ+儿茶素组eNOS mRNA(P<0.05)和蛋白表达(P<0.01)均明显增高。AngⅡ+儿茶素组eNOS蛋白表达较Ang Ⅱ组显著增加(P<0.05)。结论Ang Ⅱ可诱导EPCs产生O.2—、灭活NO、刺激eNOS基因与蛋白表达增高,儿茶素可能是通过有效清除O2·—、减少NO的失活、降低eNOS蛋白的解偶联以减少EPCs的凋亡。

• 单位
  中南大学湘雅二医院